㈠粪便检查：粪便在显微镜下见脓细胞和白细胞增多，隐血试验呈阳性。粪便涂片作革兰氏染色，可发现阳性球菌大量增多，而阴性杆菌减少。必要时作重复涂片检查以观察球、杆菌的比例变化。如有条件，可用双酶梭状芽胞杆菌抗霉素中和法测定粪便中有无难辨梭状芽胞杆菌霉素的存在。不含细胞的粪便滤液在组织培养中产生的细胞霉素作用可由抗霉素来中和，可用以帮助确定诊断。

　　㈡血液生化检查：可见电解质紊乱，常有低钾、低钠及低蛋白血症。血清白蛋白要低于3%，白细胞计数可高达20×109/L以上，且以中性细胞为主。

　　㈢组织学检查：粘膜上附着粘液、纤维素、坏死细胞及多核白细胞组成的伪膜。肠粘膜的炎症区有坏死，粘膜深层无破坏，但固有层中有多核白细胞，浆细胞及淋巴细胞浸润。血管腔内有血栓形成。

　　㈣肛门镜、乙状结肠镜检查：可见粘膜充血、水肿、糜烂、溃疡、直肠乙状结肠有多发性隆起的斑片或融合为大片的灰绿色褐色伪膜覆盖粘膜面，是本病的主要征象。严重者互相混合。伪膜邻近的粘膜可呈水肿、充血，触及易出血。也可见散在溃疡。伪膜性病变主要累及左侧结肠或全结肠，少数累及回盲部。

　　㈤X线检查：腹部X线平片无特殊发现，可显示肠麻痹或肠曲扩张，可见液平面，由于结肠水肿，可出现拇指样印迹。偶而可出现自发性巨结肠。钡剂X线，在早期或轻型患者无特殊改变，晚期和重病者，可见结肠蠕动增快，粘膜增厚，肠曲痉挛、扭曲、粘膜溃疡等。钡剂灌肠常可使病情加重，故一般不主张施行。