检查患者是否有肢端肥大、皮肤有紫纹、视力减弱、视野缺损，男性是否胡须和腋毛减少、乳房发育、生殖器变小等。
正常PRL值女性为20~30μg/L，男性为20μg/L。如PRL≥200μg/L，可以诊断PRL瘤；
PRL<100μg/L则不能轻易诊断PRL腺瘤，因为下丘脑和垂体的疾病、出血及治疗高血压、镇静镇痛、抗抑郁等药物均会引起血清PRL轻度升高。
垂体GH细胞分泌，受下丘脑调节，测定血清GH和促生长因子（IGF-1）有助于诊断GH瘤。
约一半的ACTH瘤患者ACTH值明显增高，同时伴有血浆皮质醇中度升高。
正常TSH值为1～5μg/L。TSH正常或增高见于垂体TSH瘤、下丘脑性甲亢、原发性甲低、甲状腺炎和甲状腺肿瘤等。TSH减低可见于垂体肿瘤、炎症和脓肿以及甲状腺功能亢进症。
垂体瘤一般促性腺激素（FSH/LH）正常或降低。垂体功能低下时促性腺激素降低，需同时测定睾丸素和雌激素及其它激素协助诊断。
正常人血浆MSH水平为20～110pg/ml，MSH增高可见于垂体功能低下患者及增生型皮质醇增多症。
根据蝶鞍的骨质变化、鞍区钙化等变化判断有无肿瘤，可用于鉴别诊断。
对软组织分辨率好，首选的影像检查。MRI检查对明确肿瘤性质、质地和了解肿瘤与周围组织关系方面有重要帮助。
对骨结构的分辨率好，有助于判断肿瘤周围有无骨质破坏、内部有无卒中或钙化。
用于观察垂体瘤的血流量等生理和生化过程，用于区别治疗中的肿瘤坏死和复发。
采用放射标记的多巴胺受体激动剂显像用于鉴别泌乳素瘤和无功能瘤，采用放射性标记的生长抑素扫描用于诊断异位ACTH综合征。
用免疫细胞化学染色法检测手术切除的标本，可对垂体瘤进行分型诊断。
垂体瘤需和其他鞍区占位的疾病鉴别，医生将从多个方面进行详细检查以判断。
起源于颅咽管的上皮肿瘤，是儿童最常见的鞍区肿瘤之一。患者常表现为发育停滞，1/3患者有尿崩症的表现，影像检查以鞍上蛋壳样钙化及囊性改变为主要特点。
为先天发育异常，多数患者可能无症状。囊肿如果发展，可压迫下丘脑、垂体和漏斗部导致头痛、垂体功能底下、高泌乳素血症等，CT或磁共振成像（MRI）检查可鉴别。
常由于先天或后天因素造成蝶鞍内相对空虚，蛛网膜下腔在脑脊液的冲击下突入蝶鞍内可以产生类似垂体腺瘤的特征。CT扫描上很容易鉴别，空蝶鞍CT表现为鞍内低密度且不被增强。
可累及下丘脑垂体系统，患者可表现为垂体功能减退、尿崩症等。CT扫描蝶鞍及垂体正常，磁共振成像（MRI）可见松果体区同时存在与鞍上信号相同的肿瘤是本病的主要特点，脑脊液瘤细胞检查及HCG测定是诊断本病的可靠方式。
指非继发于其他部位的炎症，也非继发于全身性疾病的垂体炎性改变。目前主要是通过术中垂体活检诊断和鉴别诊断。
原发性甲状腺功能减退可导致垂体增生。表现为甲减的症状，同时甲状腺激素降低、促甲状腺激素（TSH）升高，磁共振成像（MRI）表现为垂体弥漫性增大。该病经甲状腺激素替代治疗后，肿大的垂体可以逐步恢复正常。
