维生素B1缺乏有周围神经炎表现者须与铅中毒、砷中毒及因白喉、菌痢、麻风等感染引起者相鉴别。有浮肿者须与肾炎、营养不良及生理性浮肿区分。尿常规检查，血浆蛋白测定以及检查有无伴随的周围神经炎症状对诊断有助。有心力衰竭表现者应同其他高输出量型心脏病伴心力衰竭，(如甲亢性心脏病，贫血性心脏病)及中毒性、病毒性心肌炎引起者鉴别。
在酗酒者，维生素B1缺乏症可与肝病，酒精中毒表现同时存在，有时不易区分，需仔细观察作出诊断。
主要依据营养缺乏史与临床表现。周围神经炎的诊断可用下法测定：
①蹲踞试验，病人取蹲踞姿势时，即觉小腿疼痛、起立困难，常用二手支持膝部帮助起立;
②腓肠肌挤压时有疼痛;
③足背、踝，小腿下部触觉及痛觉减退;
④踝、膝反射异常，大都减退或消失。
暴发型脚气病性心脏病的诊断依据为：
①有3个月以上的维生素B1营养缺乏史及周围神经炎的征象;
②急骤发生的高输出量型心力衰竭，伴有烦渴;
③心脏增大，节律规则，无其他病因可查;
④对于可疑病例立即作治疗试验，本病在治疗后症状迅即改善。
