主要对患者进行神经系统的体格检查，检查患者感觉神经、生理及病理反射、肌力、肌张力等情况。
从粪便中分离到脊髓灰质炎病毒，然后利用测序分析或者特异性抗血清中和实验鉴别其血清型，是本病最重要的确诊性试验。
脊髓灰质炎病毒血清型分为3型，特异性抗血清中和实验可检测血清型，恢复期血清中IgG抗体比急性期抗体效价升高4倍以上有诊断意义。
不同时期的脑脊液检查结果有区别。前驱期脑脊液一般正常，瘫痪前期脑脊液压力增高，白细胞轻度增加，蛋白轻度增加，细胞数多于瘫痪后3周时恢复正常，蛋白质可在4~6周时恢复正常，呈现蛋白-细胞数分离现象，糖、氯化物和脑脊液培养一般正常。
