本病大多数仅有轻度腹痛，如疼痛剧烈，腹肌紧张者，应立即去医院就诊，排除因蛲虫所引起的阑尾炎、腹膜炎或其他急腹症。蛲虫引起会阴部皮肤瘙痒，与会阴真菌感染、过敏及湿疹所致症状相似;蛲虫性泌尿道炎症与一般泌尿道感染临床表现相似，均应注意区别。结合年龄、发病特征和局部体征，临床诊断多无困难。肛周查见蛲虫或虫卵是鉴别诊断的直接证据。
如肛门周围或会阴部经常奇痒，患儿夜间烦躁不安时，应注意有蛲虫病的可能，若能查到虫体、虫卵即可确诊。
一虫卵检查法：由于蛲虫特殊的产卵习性，粪便中虫卵检出的阳性率为5%以下。肛门外虫卵检查法有。
1.擦拭法：将棉拭子先置于消毒生理盐水中，用时拧干，擦拭肛门周围，在滴有50%甘油溶液的载玻片上混匀后进行镜检。也可应用牙签的扁头插入有50%甘油或1%氢氧化钠溶液中浸润，然后用其刮拭肛门周围皱褶，将刮拭材料用盖玻片刮下，涂在载玻片上滴50%甘油或1%氢氧化钾1滴镜检。
2.漂浮法：用棉拭子置于生理盐水中，挤干，擦拭肛门周围，然后将棉试子放入有饱和盐水的试管中，充分振荡使虫卵洗入盐水内，再漂浮集卵进行镜检。
3.透明胶纸粘拭法：早晨排便前用透明胶纸粘拭肛门周围皮肤，在显微镜低倍镜下检查，连续3次，阳性率可达79.4%。该法简单，适合普查时应用。
二虫体检查法：患儿入睡后1～3小时检视肛门，如有虫体爬出，可用镊子挟住入入有酒精的小瓶中保存。因为蛲虫不一定每晚都爬出排卵，需要连续观察3～5天。
