根据全身与局部症状和体征，多可诊断，本病患者多有发热、关节肿胀、触痛，局部温度增高等症状，关节穿刺和关节液检查对早期诊断很有价值，应作细胞计数、分类、细胞涂片革兰染色来找病原菌，抽出物应作细菌培养和药物敏感试验，以指导下一步抗生素的选用。
化脓性关节炎常需与关节结核、类风湿关节炎、创伤性关节炎等疾病相鉴别，医生会从发病急缓、发热情况、关节发病数量、发病部位、检查结果等方面进行鉴别。
两者都好发于膝、髋关节，但化脓性关节炎发病急，有高热，急性炎症症状明显，周围血象高，关节结核发病慢，为低热，急性炎症症状不明显，周围血象正常，还可结合关节穿刺液的结果来鉴别。
两者均有关节肿痛，但化脓性关节炎发病急，有高热，多为单个关节发病，类风湿关节炎发病缓慢，少见高热，常多个关节发病，可结合关节穿刺液检查来鉴别。
两者均可发生于膝、踝关节，但化脓性关节炎发病急，有高热，急性炎症症状明显，创伤性关节炎发病缓慢，没有高热，无炎症表现，可通过关节穿刺液检查来鉴别。
