屈光参差的诊断主要依靠在验光检查，并要检查双眼视力、单眼视力及交替视力。
按照(1985) 统一标准，诊断容易建立，两眼屈光度相差球镜≥1.50D，柱镜≥1. 00D为病理性屈光参差，破坏双眼单视，导致弱视的发生。此外，还需结合患者的临床表现，包括单眼视力、重影、视功能障碍等。
屈光参差可与屈光不正进行鉴别。
屈光不正是指外界平行光线不能正常聚集在视网膜黄斑部，无法产生清晰的影像，包括近视、远视、散光等类型。屈光参差是指两眼的屈光程度有显著性差异，病理性屈光参差一般指两眼屈光度相差球镜≥1.50D，柱镜≥1. 00D。
一般通过验光检查即可明确鉴别。
