实验室检查
1.周围血象
急性期白细胞常稍低或正常,淋巴细胞相对增多,偶可有异常淋巴细胞,但一般不超过10%,慢性肝炎白细胞常减少。急性重症肝炎则白细胞总数及中性粒细胞百分比均可显著增加。部分慢性肝炎病人中血小板可减少。
2.肝功能试验
(1)血清酶测定血清酶的种类繁多,主要检查反映肝实质损害的酶类。根据国内经验,丙氨酸氨基转移酶(ALT)羧门冬氨酸氨基转移酶(AST)更灵敏,应用也更广泛,虽然其特异性不强,但如能除外其他引起升高的因素,特别是当数值很高时(大于正常值10倍以上),持续时间较长时,对肝炎的诊断价值很大。
AST有两种,一种位于细胞质的ASTs,另一种为ASTm,存在于肝细胞线粒体中,重症肝炎时ASTm增加为主。由于ASTm的半衰期短于ASTs,故恢复也较早,急性肝炎中ASTm持续升高时,有变为慢性的可能。慢性肝炎中,ASTm持续增多时,应考虑为慢性活动性肝炎。
(2)其他凝血酶原时间及其活动度的测定可用于判定重症肝炎。如注射维生素K后仍明显异常,常表示肝细胞组织严重受损,预后不良。此外如胆固醇、胆固醇酯明显降低,亦常提示预后不良,血氨测定有助于肝性脑病的诊断。
1.甲型肝炎
(1)病原学检查在潜伏期后期或急性早期,可检测到HAV病毒与抗原。
(2)血清学检查测定抗HAV抗体,常用RIA和EIA法,可分别测定抗HAVIgM和IgG抗体。抗HAV-IgM急性期病人发病第1周即可阳性,1~2月抗体滴度和阳性率下降,于3~6月后消失,因此对早期诊断十分重要,特异性高。抗HAV-IgG在急性期后期和恢复早期出现,持续数年或以上,主要用于了解过去感染情况及人群中免疫水平,对流行病学调查更有意义。
2.乙型肝炎
HBV抗原—抗体的测定人体感染HBV后,血液中可出现一系列的HBV有关的血清学标志,可作为临床诊断和流行病学调查的指标。常用的标志有HBsAg、HBcAg和HBeAg及其抗体系统。测定方法以RIA和EIA为最灵敏。
(1)HBsAg和抗-HBs的检测HBsAg阳性是HBV感染的特异性标志,其滴定度随病情恢复而下降,慢性肝炎、无症状携带者可长期检出HBsAg,但HBsAg的滴度与病情无平行关系。HBsAg为病毒表面外壳,无传染性。血清中抗-HBs阳性,提示有过HBV感染,它是一种保护性抗体,血清中出现阳性表示机体有免疫力,不易再次得乙型肝炎。此外,乙型肝炎预防接种后,检测抗-HBs是评价疫苗效果的重要指标之一。
(2)HBeAg与抗-HBe的检测由于HBeAg是核心抗原的成分,其阳性和滴度常反应HBV的复制及判断传染性的强弱。急性乙肝时HBeAg呈短暂阳性,如持续阳性提示转为慢性,在慢性HBV感染时,HBeAg阳性常表示肝细胞内有HBV活动性复制;当HBeAg转阴时,伴抗HBe转阳常表示HBV复制停止。抗HBe出现于急性乙肝的恢复期,可持续较长时期。抗HBe的出现意味着血清中Dane颗粒少或无,传染性低。
(3)HBcAg与抗HBc检测应用电镜和免疫酶染色技术可检出肝细胞核内的HBcAg。一般认为,血清中无游离的HBcAg,故不能直接从血清中测定HBcAg,但可从血中找Dane颗粒,用去垢剂脱去Dane颗粒的蛋白外壳,暴露出HBcAg,以已知的抗HBc用酶标法可检测HBcAg。HBcAg阳性表示HBV在体内复制,反映血清中Dane颗粒数量与DNA多聚酶关系密切。抗HBc包括抗HBc总抗体、抗HBcIgM、抗HBcIgG。抗HBc出现于急性乙型肝炎的急性期,恢复后可持续数年或更长,滴度则逐渐下降。慢性HBV感染者,抗HBc持续阳性。单项抗HBc阳性表示过去可能感染过HBV,需与其他标志结合起来判断,分别测抗HBcIgM和抗HBcIgG更有意义。急性乙肝病人抗IgM呈高滴度阳性,特别对于HBsAg已转阴的病人(窗口期),抗HBcIgM阳性可确诊为急性乙肝。抗HBcIgG出现时间较迟于HBcIgM,主要见于恢复期和慢性感染。
(4)前S1、前S2和PHSA受体(与多聚人血清白蛋白结合的能力)均为HBV的外壳蛋白,其阳性率和滴定度与HBsAg滴度、HBeAg、HBV-DNA呈正相关,可作为HBV感染的新标志。血清中前S1抗体阳性是急性乙型肝炎早期诊断指标,因抗-前S1在乙肝潜伏期出现,前S2抗体在病毒复制终止前出现,故血清中抗-前S2是肝炎复制期的指标。
病毒标志
(1)HBV-DNA的检测应用DNA分子杂交和PCR技术测定,HBV-DNA阳性表示体内有HBV复制,对本病确诊和抗病毒药物疗效考核有参考意义。
(2)DNA多聚酶检测为HBcAg核心成分,DNA多聚酶(DNAP)阳性为HBV存在的直接标志之一,并表示体内病毒在复制。
3.丙型肝炎
现如今HCV体外培养系统还没建立,还不知道HCV抗原的全部免疫学特征,并由于病毒变异和血清标志水平低微,故HCV的检测困难。血清抗原低于现行方法的可检出水平,只能检出抗体。
(1)抗HCV检测血清中出现HCV抗体可诊断为HCV感染。现如今抗-HCV试剂分别来自各个基因片段,存在着不同的敏感性和特异性,亦可能出现假阳性和假阴性。如抗体阳性不能区分是现症感染或是既往感染,不能确定感染已痊愈还是仍携带病毒具有传染性,故对每一检测报告的解释,需要密切联系临床,并要熟悉各种试剂的特点、意义、价值和限制。判定发生困难时,还需用PCR法检测HCVRNA来确定。
(2)HCVRNA检测检测血清抗体不是病毒血症的直接证据,近年来采用反转录RNAPCR检测血中HCV-RNA特异性强、敏感性高、阳性出现早。应用较广,可检测组织和体液中RNA,但操作程序较复杂,技术要求严,检测成本高,只限于有条件实验室进行研究。
4.丁型肝炎
HDV是缺陷性病毒,只能依附HBV感染而复制和表达。而丁型肝炎无特殊临床特征,遇下列情况应考虑:HBsAg携带者急性肝炎发作,急性肝炎有双相转氨酶升高,乙型慢活肝但无HBV复制,原有乙肝合并重型肝炎或肝衰竭,主要诊断根据血清内病毒RNA、HDAg、抗HDV抗体和肝组织内HDAg和病毒RNA测定,但以血清学方法测抗原和抗体最普通。
(1)HDAg当患急性肝炎时,血清HDAg出现于潜伏期后期和急性期早期,以后很快消失,慢性感染时,用RIA或EIA的检出率极低,但用免疫印渍法测定仍可检出,或当抗HDV出现后转阴,但肝脏内持续有HDAg。
(2)抗HDV分别测定HDV-IgM和抗HDV-IgG。急性HDV感染时,临床症状出现数天后,抗HDV-IgM出现阳性,一般出现2~4周,抗HDVIgG随后阳性。二者抗体的滴度一般不高。慢性HDV感染时,抗HDV-IgM持续阳性,并伴有高滴度的抗HDV-IgG。测定HDV-IgM不仅有助于早期诊断,其滴度的下降和增高,往往表示病情的缓解和进展。
(3)HDV-RNA用分子杂交技术、核酸印迹试验或PCR法可测定血清和肝脏内病毒核酸的存在。
5.戊型肝炎
(1)粪便病毒检测从潜伏期和急性期初期的病人粪便中,急性和恢复期血清处理后,可用免疫电镜(IEM)检测到27~34nm病毒样颗粒。
(2)特异性抗体测定患者急性期血清内含有高滴度的IgM抗体,在恢复期病人血清内可测出低水平的IgG抗体。