关注生命体征、腹部查体、直肠指检、（女性）妇科检查等。
腹膜炎时会出现白细胞计数升高，中性粒细胞百分比升高等异常。
作为判断组织损伤和炎症的指标，腹膜炎时C反应蛋白也会升高。
临床上作为鉴别细菌感染与其他微生物感染的手段，在腹膜炎合并细菌感染时会升高，重症患者升高更明显。
宫外孕可引起腹腔出血，化验hCG升高，可加以鉴别。
血、尿淀粉酶升高，应考虑急性胰腺炎。
胆红素升高应考虑胆道疾病。可评估器官功能。
可以了解肝、胆、胰、脾的状况。确定有无胆囊肿大、胆道扩张、胆囊或胆道结石，了解胰腺有无水肿、轮廓是否清晰。
如是消化道穿孔或内脏破裂，则可见腹腔内积液，肠梗阻时可见肠拌扩张和肠道内积液。
超声检查对明确腹膜炎的病因有重要价值。
此外，肠间隙增宽、腹膜外脂肪线模糊不清也是急性腹膜炎的表现。
CT对腹腔内实质性脏器病变（肝、脾损伤，急性胰腺炎等）的诊断帮助较大。
腹腔穿刺是诊断急性腹膜炎的重要方法，适用于诊断不十分明确而又有腹腔内积液的病例。若能穿刺得到液体，根据其性状可获得颇有价值的诊断线索。
此外，穿刺液应根据需要做常规检查以及涂片、细菌培养、药敏实验等检查。
已婚妇女如后穹隆饱满者，排除妇科疾病，可做后穹隆穿刺。
对于前述方法无法明确诊断的急性腹痛患者，进行腹腔镜检查是一种可选的方式，在明确诊断的同时亦可以进行治疗。
