新生儿期筛查

新生儿哺乳72小时后，采集足跟末梢血，滴在专用干血滤纸上，晾干后邮寄到筛查中心，检测血苯丙氨酸浓度。当苯丙氨酸含量>120μmol/L（2mg/dl）或同时伴有苯丙氨酸/酪氨酸（Phe/Tyr） >2.0为阳性，需召回复查，复查仍呈阳性，则采静脉血定量测定苯丙氨酸和酪氨酸，计算Phe/Tyr，排除其他原因所致的继发性血Phe增高。

• 正常苯丙氨酸浓度 <120 μmol/L（2 mg/dl）。
• 经典苯丙酮尿症的苯丙氨酸浓度 >1200 μmol/L（20 mg/dl）。
• 中度苯丙酮尿症的苯丙氨酸浓度为360~1200 μmol/L。
• 轻度苯丙酮尿症的苯丙氨酸浓度为120~360 μmol/L。

患儿血浆苯丙氨酸浓度明显升高，但血中酪氨酸浓度可能正常或稍低。

尿蝶呤图谱分析

尿蝶呤图谱分析是目前国内诊断四氢生物蝶呤合成酶缺乏症的重要方法。医生应用高压液相分析测定尿液中新蝶呤和生物蝶呤的含量，计算生物蝶呤比例B%[B/（B+N）× 100%]。各种酶缺乏患儿呈现不同的尿蝶呤谱。

红细胞DHPR活性测定

这是二氢生物蝶呤还原酶（DHPR）缺乏症的确诊方法，四氢生物蝶呤的合成和再生途径需要有DHPR的催化，医生会采用双光束分光光度计测定干滤纸血片中红细胞DHPR活性。

四氢生物蝶呤负荷实验

为判断是否为四氢生物蝶呤反应型高苯丙氨酸血症的实验方法及四氢生物蝶呤缺乏症的辅助诊断方法，对于轻度苯丙酮尿症或已用特殊饮食治疗后血苯丙氨酸浓度已降低者，可先做尿蝶呤分析及DHPR活性测定，对诊断不确定者再进行四氢生物蝶呤负荷试验，试验前及试验过程中正常饮食。

DNA分析和基因诊断

美国国立卫生研究院关于苯丙酮尿症的共识发展会议推荐：进行初始诊断、遗传咨询、随访和评估长期预后时，应对所有患者进行突变分析和基因型确定。

基因诊断是高苯丙氨酸血症病因的确诊方法，建议常规进行苯丙氨酸羟化酶基因及四氢生物蝶呤合成酶缺乏症相关基因突变检测。

其他辅助检查

脑电图

对于有抽搐发作的患儿，应及时做脑电图，判断是否存在脑内异常放电，必要时需同时使用抗癫痫药处理。脑电图随访研究显示，随年龄增长，脑电图异常表现逐渐增多，至12岁后脑电图（EEG）异常才逐渐减少。

脑磁共振成像

用于评价患儿脑损伤的程度。未经治疗或疗效不良的患儿可有脑萎缩及脑白质的异常，髓鞘发育不良或（和）脱髓鞘病变，脑白质空泡变性及血管性水肿。

产前检查

在家族中有苯丙酮尿症患者及其父母致病基因变异明确的前提下，可到具有产前诊断资质的机构进行产前诊断以及后续的遗传咨询。